乙肝在研新药GS-9688，II期部分进展





日本大阪大学医学研究生院微生物和免疫学系病毒学科开发了一个体外检测系统，使用纯化的HBV RT来寻找潜在的逆转录酶（RT）抑制剂。这项科研成果是高纯度乙型肝炎病毒转录酶活性区的筛选及其应用下部分，发表在2020年7月31日的科学杂志《Viruses》上。



乙肝针对聚合酶新药指引，日本科学家获得，高纯度HBV- RT

简单的讲，日本大阪大学医学研究生院已经成功开发并获得了高纯度的HBV RT。研究结果表明，纯化的RT蛋白具有T/P和底物结合活性。随着YMDD的突变，底物结合活性显示丧失，但T/P结合活性则不明显。研究人员介绍，这些结果与先前的研究结果并不冲突，因为HIV-1rt的YMDD基序比T/P结合更重要，且YMDD附近的WMGY基序，在引物抓握中起着更重要的作用。

新开发的筛选抗乙肝病毒药物系统，可以找出几种HBV RT候选抑制剂，其中一些先前还被认为是抗病毒聚合酶试剂。提示HBV- RT的延伸活性需要部分RNase H结构域（其他研究者未发表的数据）。然而，“T/P和底物”结合试验被认为是寻找候选NNRTIs的有效方法。T/P结合和底物结合，都是乙肝病毒聚合酶（包括HBV Pol）所需的常见关键步骤。



因此，与T/P和传入d NTPs相互作用的功能域，在其他物种的RTs中高度保守。此外，日本大阪大学医学研究生院研究人员还发现，一些hit化合物可抑制具有聚合/延伸活性的MMLV RT（SS II）活性。结果表明，这些被鉴定的化合物对HBV- RT和MMLV-RT活性显示出相似的抑制作用。在这里进行的细胞检测中，化合物3明显抑制了乙肝病毒复制。

因为它不能抑制乙肝表面抗原（HBsAg）基因的转录，所以不能抑制HBsAg的转录RNA包装和DNA合成。由于hit化合物是作为RT蛋白特异性活性的抑制剂获得的，因此，在基于细胞检测中，这些化合物表现出完全相同的抑制活性是合理的，但必须通过使用内源性聚合酶分析，来澄清基于细胞的检测中作用机制的细节。



化合物3在NTCP/G2和HB611细胞中抑制细胞内核心相关HBV DNA形成的假定选择性指数（SI=CC50/IC50）分别为558和55，而HB611细胞中细胞外颗粒相关HBV DNA的SI值为353。因此，对该化合物的进一步化学优化有望产生一种新的抗HBV药物；仍需要更精确的分析来阐明其作用机制。进一步研究这些药物的作用机制，将有助于开发新型抗HBV药物。

在最近的一项研究表明，使用NRTIs和NNRTIs的药物联合治疗对HIV-1株（包括对NRTIs耐药的株）的感染具有更强的协同抑制作用。请注意，在临床环境中，本研究的结果可能不会降低HBV相关疾病的发病率；有必要对化合物进行进一步的化学修饰，并使用动物模型系统评估这些化合物的效果和细胞毒性，以研究其特定的作用机制。



为了克服乙肝病毒相关疾病，清除病毒模板cccDNA是至关重要的。许多研究者提出了新的策略来消除cccDNA，例如基因编辑。然而，这些方法在临床上似乎需要花费很多时间，针对病毒生命周期各个阶段的多药联合治疗应该是治疗HBV感染患者更现实的策略。开发的筛选系统对开发针对HBV聚合酶的新药具有一定的参考价值（日本科学家原文点评）。

研究结果已发表2020年7月31日科学杂志《Viruses》，Eriko Ohsaki和Keiji Ueda等来自日本大阪大学医学研究生院微生物和免疫学系病毒学科研究人员共同完成